細胞培養(yǎng)過程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細胞之方法：
人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞說明書冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞說明書
種屬:HK-2

類型:貼壁生長

形態(tài):上皮細胞樣

提供形式:T25細胞培養(yǎng)瓶/凍存管

安全等級:2

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:90%高糖DMEM（含4mM L-谷氨酰胺、丙酮酸鈉）+10%FBS

生長條件:95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

存儲條件:90%FBS+10%DMSO 液氮

細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞凍存步驟：

細胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

收到人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞說明書處理方法
1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
以下是人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞說明書的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
獐牙菜苷（標準品）Sweroside質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品  小鼠組織蛋白酶D(CTSD)ELISA試劑盒 ，英文名： CTSD ELISA Kit  組織樣品組織蛋白酶B(CATHEPSINB)活性比色法定量檢測試劑盒20

獐牙菜苦苷(標準品)Swertiamarin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品  綿羊白介素2(IL-2)ELISA檢測試劑盒SheepIerleukin2,IL-2ELISAKit 96T/48T  HumanHeatShockProtein90，HSP-90ELISAKit人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

樟腦（標準品）Camphor質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥96%，標準品  犬受體β(ISR-β)試劑盒 Canine Insulin Receptor β,ISR-β ELISA KIT  人緊張素(1-7)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

暈苯(>95.0%(GC))Coronene質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)  英文名稱Mouse8-iso-ProstaglandinF2aELISAKIT小鼠8-異素F2α(8-ISOPGF2a)規(guī)格：96T/48T  豬熱休克蛋白60,線粒體(HSPD1/Hsp-60)試劑盒 Pig 60 kDa heat shock protein,mitochondrial(HSPD1)ELISA kit
犬孕激素/孕酮(PROG)ELISA檢測試劑盒CanineProgesterone,PROGELISAkit 96T/48T  84687-43-4黃芪甲苷   Astragaloside IV

犬維生素A(VA)試劑盒 Dog Vitamin A,VA ELISA Kit  84680-75-1黃芪皂苷I說明書  Astragaloside I  

英文名稱HumanGlycoprotein96ELISAKit人排斥性抗原gp96(gp96)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  84676-89-1黃芪皂苷II品牌  Astragaloside II

超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測試劑盒50  84687-42-3黃芪皂苷Ⅲ規(guī)格  Astragaloside III

RatGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISA試劑盒大鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  17429-69-5黃芪總皂苷   Astragaloside
572-30-5扁蓄苷品牌  Avicularin   豬氧化(OxLDL)試劑盒 Porcine oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISA Kit

572-30-5扁蓄苷規(guī)格  Avicularin   豬氧還原蛋白過氧化物酶2(PRDX2)試劑盒 Pig peroxiredoxin 2,PRDX2 ELISA kit

57-22-7長春新堿規(guī)格  Vincristine   豬血小板衍生生長因子(PDGF)試劑盒 Porcine platelet-derived growth factor,PDGF ELISA Kit

57-22-7長春新堿規(guī)格  Vincristine   豬血小板活化因子(PAF)試劑盒 Pig platelet activating factor,PAF ELISA Kit

568-73-0丹參酮I規(guī)格  Tanshinone I   豬血小板活化因子(PAF)ELISA檢測試劑盒Porcineplateletactivatingfactor,PAFELISAKit 96T/48T
人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞說明書貓細小病毒抗體(FPV)ELISA檢測試劑盒Felisparvovirus,FPVELISAKit 96T/48T  539-86-6大蒜素品牌  Allicin

犬血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)試劑盒 Canine serum amyloid A2,SAA2 ELISA Kit  55481-88-4大葉茜草素規(guī)格  Rubimaillin

英文名稱MouseAILR3ELISAKIT小鼠AILR3規(guī)格：96T/48T  122021-74-3丹參酚酸B甲酯   Monomethyl lithospermate B 

腸胃活檢螺旋桿菌(H.PYLORI)吉姆薩(GIEMSA)染色試劑盒50  22681-72-7丹參素說明書  Danshensu

RatGATAbindingprotein4,GATA4ELISA試劑盒大鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  67920-52-9丹參素鈉品牌   Danshensu