培養(yǎng)操作步驟：
人成纖維細胞說明書1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。產品僅用于科研 

資源名稱　人成纖維細胞
種屬:MH7A

類型:貼壁生長

形態(tài):成纖維細胞樣

分離基物關節(jié)；成纖維細胞；SV40轉化；女性

提供形式:T25細胞培養(yǎng)瓶/凍存管

安全等級:1

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:90%高糖DMEM（含4mM L-谷氨酰胺、丙酮酸鈉）+10%FBS

生長條件:95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

存儲條件:90%FBS+10%DMSO 液氮

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、學、生物化學、遺傳學、分子生物學等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經濟可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。
以下是公司正在在熱銷的產品：
重水,氧化氘(0.6ml*10)Deuterium Oxide質量規(guī)格：D,99.9%  犬表面抗原(HBsAg)試劑盒 Canine hepatitis B virus surface aigen,HBsAg ELISA Kit  人內皮生長因子165(VEGF165) ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

重水,氧化氘(0.6ml*10)Deuterium Oxide質量規(guī)格：D,99.96%  英文名稱MouseBALPELISAKit小鼠BALP規(guī)格：96T/48T  豬生長激素(GH)試劑盒 Porcine growth hormone,GH ELISA Kit

重水,氧化氘(10G)Deuterium Oxide質量規(guī)格：D,99.96%  冰凍切片組織組蛋白熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20  HumanSolubleprotein-100B,S-100BELISAKit 人S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

重水,氧化氘(25G)Deuterium Oxide質量規(guī)格：D,99.9%  RatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISA試劑盒RatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISA試劑盒大鼠凝血因子IX(FIX)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/HLAⅠELISA試劑盒人主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
山羊γ干擾素(IFN-γ)ELISA檢測試劑盒GoatIerferonγ,IFN-γELISAKit 96T/48T  520-33-2橙皮素   Hesperitin

犬血纖蛋白原降解產物(FDP)試劑盒 Canine Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA Kit  73-03-0蟲草素說明書  cordycepin

英文名稱Mouse17-ANPELISAKit小鼠17-羥-孕同(17-ANP)規(guī)格：96T/48T  478-01-3川陳皮素品牌  Nobiletin

腸產毒性大腸桿菌(EerotoxigenicE.coli)鑒定16SrDNAPCR擴增檢測試劑盒20  58812-37-6川楝素規(guī)格  Toosendanin

RatFreeThyroxine,FT4ELISA試劑盒大鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  1124-11-4川芎嗪   Chuanxiongzine
78432-77-610-去乙酰紫杉醇   Deacetyltaxol   組織Akt/PKB激酶總活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

78281-02-4羥基紅花黃色素A品牌  Hydroxysafflor yellow A   組織5-羥色胺-N-乙?；D移酶(SerotoninN-Acetylansferase)活性比色法定量檢測試劑盒20

78214-33-2人參皂苷Rh2品牌  Ginsenoside Rh2  組織5-焦1酸甲戊二羥酸脫羧酶(mevalonate5-pyrophosphatedecarboxylase)活性比色法定量檢測試劑盒20

781658-23-94-羥基異亮氨酸   4-Hydroxyisoleucine   組織5’-核苷酸酶(5’-)活性比色法定量檢測試劑盒20

77-92-9枸櫞酸品牌  Citric Acid    組織3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)合成酶活性比色法定量檢測試劑盒20
人成纖維細胞說明書RatHomocysteicacid,HcyELISA試劑盒大鼠同型半胱氨酸(Hcy)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  61825-98-7西貝母堿品牌  Sipeimine

小鼠脂蛋白相關1脂酶A2(Lp-PLA2)ELISA試劑盒 ，英文名： Lp-PLA2 ELISA Kit  42553-65-1西紅花苷規(guī)格  Crocin

小鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA檢測試劑盒MouseSerumamyloidA,SAAELISAKit 96T/48T  94238-00-3西紅花苷I   Crocin I

人巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)試劑盒 Human MIP-3α ELISA kit  55750-84-0西紅花苷II說明書  Crocin II

Rataldehydedehydrogenase,ALDHELISAKit大鼠乙脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  59219-65-7豯薟苷品牌  Darutoside
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數，按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液＝(四方格細胞數之和/4) ×104。產品僅用于科研
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續(xù)計數10d，繪制細胞生長曲線
人成纖維細胞說明書來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。