資源名稱　小菊頭蝠肺成纖維樣細胞產(chǎn)品僅用于科研
種屬:LHBL2

形態(tài):成纖維細胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

生長特性:貼壁生長
小菊頭蝠肺成纖維樣細胞說明書來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。

培養(yǎng)操作步驟：
小菊頭蝠肺成纖維樣細胞說明書1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時； 
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。 
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用*化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學(xué)、免疫學(xué)、學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經(jīng)濟可提供大量、同一時期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實驗對象。

操作流程：
產(chǎn)品僅用于科研1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線

以下是公司正在在熱銷的產(chǎn)品：
佐米曲坦 N氧化物Zolmitriptan N-Oxide質(zhì)量規(guī)格：美國進口  RatIerleukin5,IL-5ELISAKit大鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

雌莫司汀Estramustine質(zhì)量規(guī)格：美國進口  CDK3蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25  小鼠鈣衛(wèi)蛋白(CALP)試劑盒 Mouse calprotectin,CALP ELISA kit

氨1汀Amifostine質(zhì)量規(guī)格：美國進口  MousemammarycarcinomaMarker-CA153ELISA試劑盒小鼠癌標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  血纖肽/纖維蛋白肽A(FPA)ELISA試劑盒 ，英文名： FPA ELISA Kit

二氫楊梅素Dihydromyricetin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，BR  小鼠素E2(PGE2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  MousecoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISA試劑盒小鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
MousesecretoryimmunoglobulinA,sIgAELISAKit小鼠分泌型球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  芹菜素-7-O-槐糖苷規(guī)格  Apigenin-7-O-β-D-sophoroside 

小鼠左右決定因子2(LEFTY2)ELISA試劑盒 ，英文名： LEFTY2 ELISA Kit  7014-39-3新異甘草苷   Neoisoliquiritin

鴨白介素2(IL-2)ELISA檢測試劑盒DuckIerleukin2,IL-2ELISAkit 96T/48T  23696-85-7突厥烯酮品牌  Damascenone 

犬誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)試劑盒 Dog inducible niic oxide syhase,iNOS ELISA Kit  5471-51-2覆盆子酮規(guī)格  4-(4-hydroxyphenyl)-2-butanone 

英文名稱MouseCXCL12ELISAKit小鼠B-細胞趨化因子12(CXCL12)規(guī)格：96T/48T  602-41-5硫秋水仙苷   Thiocolchicoside
鹽酸血根堿   Sanguinarine Chloride  組織無機1/游離1酸根離子比色法定量檢測試劑盒20

續(xù)隨二萜醇   Euhorbiasteroid   組織維生素A含量熒光定量檢測試劑盒20

新苦參酮規(guī)格  Norkurarinone    組織維生素A含量比色法定量檢測試劑盒20

新苦參醇品牌  Neokurarinol    組織維生素A高效液相色譜法定量檢測試劑盒20

豨薟乙素   orientalinB  組織唾液酸(SA)比色法定量檢測試劑盒50
小菊頭蝠肺成纖維樣細胞說明書Humanβ2-Glycoprotein1AibodyIgG,β2-GP1AbIgGELISA試劑盒人β2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1AbIgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  464-74-4沙蟾毒精   Arenobufagin

小鼠組蛋白H4(H4)ELISA試劑盒 ，英文名： H4 ELISA Kit  472-26-4遠華蟾蜍精說明書  Telocinobufagin

山羊白介素2(IL-2)ELISA檢測試劑盒GoatIerleukin2,IL-2ELISAKit 96T/48T  465-39-4酯蟾毒配基品牌  Resibufogenin

犬(NO)試劑盒 Canine niic oxide,NO ELISA Kit  465-21-4蟾毒靈規(guī)格  Bufalin

英文名稱Mouse25(OH)D3ELISAKit小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3)規(guī)格：96T/48T  471-95-4蟾毒它靈   Bufotalin