細胞培養(yǎng)過程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細胞之方法：
倉鼠腎細胞 冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　倉鼠腎細胞
種屬:BHK-21

形態(tài):成纖維細胞樣　

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS

生長特性:貼壁生長

細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞凍存步驟：

細胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

收到倉鼠腎細胞 處理方法
1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
以下是倉鼠腎細胞 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
Hep G2, 人細胞系4-甲基傘花基1酸鈉三水質(zhì)量規(guī)格：>98%，分子生物學(xué)級MUP, di salt, trihydrate

CD3D & CD3E Others Mouse 小鼠 CD3D & CD3E Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,4-雙(5-苯基-2-噁唑基)苯(>98%,Scint Grade)質(zhì)量規(guī)格：>98%POPOP

人胚腎上皮細胞系;KiMA菊酯(標準品)質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,99.5%Etofenprox

KP-N-NS細胞，人腎上腺神經(jīng)母細胞瘤細胞() 小鼠細胞,P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]細胞 CL-0397NCI-H23(人非小細胞細胞)5×106cells/瓶×2乙蒜素(標準品)質(zhì)量規(guī)格：分析標準品,99%Ethylicin

LS 180(人腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2芥酸(標準品)質(zhì)量規(guī)格：分析標準品Erucic acid
CL-0078EL4(小鼠瘤細胞)5×106cells/瓶×23-甲基黃酮-8-羧酸（標準品）質(zhì)量規(guī)格：供檢查用3-Methylflavone-8-carboxylic acid

H9c2大鼠心肌細胞(ATCC來源)鹽酸番茄堿（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品Tomatidine

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞(彝族);KM934 人臍平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL鹽酸頭孢唑蘭質(zhì)量規(guī)格：>97%,BRCefozopran

AGS人胃腺癌細胞阿嗪米特（標準品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Azintamide

EPHB6 Others Mouse 小鼠 EphB6 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸黃連堿（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Coptisine chloride
TT(人甲狀腺導(dǎo)管癌細胞) 5×106cells/瓶×2二硫赤蘚糖醇shēng huà shì jì容量：500克

HSC-T6(大鼠肝星形細胞) 5×106cells/瓶×2 hDPSCs, 人前牙髓干細胞 人原胚腎轉(zhuǎn)化細胞;293 Ad5橙黃G6 Orange G 1936-15-8 25G 通用試劑

人胚胎膀胱組織來源細胞;CCC-HB-2羌炳基纖維速 xy7noxypropyl Cqllulosq 9004-64-

人小氣管上皮細胞(HSAEpiC)(5×105 )2,2-二羥基二硫代-6,6-聯(lián)奈shēng huà shì jì容量：100毫升

CL-0287M14(人色素瘤細胞)5×106cells/瓶×210101-63-0化Lead(II) iodide
倉鼠腎細胞 人胚腎細胞(SV40T基因修飾);293T/17苷新酮（標準品）Nardosinone質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

CADM4 Others Mouse 小鼠 CADM4 / IGSF4C / TSLL2 人細胞裂解液 (陽性對照) 白花前胡乙素（標準品）Praeruptorin B質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

NCI-H1299 人非小細胞細胞白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ；蒼術(shù)內(nèi)酯II（標準品）Atractylenolide II質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

LncaP, 人細胞斷血流皂苷A（標準品）Clinodiside A質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

GRN Protein Human 重組人 Granulin / GRN / Progranulin 蛋白 (His 標簽)三白草酮（標準品）Sauchinone質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品