細胞培養(yǎng)過程：

產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細胞之方法：
大鼠小腸隱窩上皮細胞形態(tài)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

資源名稱　大鼠小腸隱窩上皮細胞形態(tài)
種屬:IEC-6

類型:貼壁生長

形態(tài):上皮樣細胞

分離基物小腸；上皮細胞；雌性；SD大鼠

提供形式:T25細胞培養(yǎng)瓶/凍存管

模式菌株:未知

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:90%高糖DMEM（含4mM L-谷氨酰胺、丙酮酸鈉）+10%FBS

傳代方法:1:3~1:6傳代；每周換液2次。

生長條件:95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

存儲條件:90%FBS+10%DMSO 液氮

細胞分類：
第一種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞凍存步驟：

細胞培養(yǎng)步驟：
產(chǎn)品僅用于科研一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。

收到大鼠小腸隱窩上皮細胞形態(tài)處理方法
1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
以下是大鼠小腸隱窩上皮細胞形態(tài)的相關熱銷產(chǎn)品：
CA4 Others Human 人 Carbonic Anhydrase IV / CA4 CHO細胞裂解液 (陽性對照) 雷米普利(標準品)質量規(guī)格：HPLC>98,標準品Ramipril

人胚腎細胞(亞系*);FIP293** 質量規(guī)格：>99%,BR*

豹貓肌肉成纖維樣細胞;LCM4 中國倉鼠體細胞，R 1610細胞 IAR20細胞，大鼠肝細胞木犀草素質量規(guī)格：HPLC≥97%,BRLuteolin

人胚胎，皮膚，肌肉;M-22木犀草素（標準品）質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Luteolin

HA Others H9N2 甲型 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 熊果酸質量規(guī)格：HPLC≥85%,BRUrsolic acid
CL-0128JeKo-1(人套細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2乙酸纖維素質量規(guī)格：BRCellulose acetate

RSV-F Others Respiratory syncytial virus/RSV 人類合胞病毒 hRSV (A2) Fusion glycoprotein / RSV-F 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 乙酸鈰(>99%，BR)質量規(guī)格：>99%，BRCerium(III) acetate hydrate

人肺動脈平滑肌細胞裂解物HPASMCL硫酸鈰四水(>99%，BR)質量規(guī)格：>99%,BRCerium(IV) sulfate tetrahydrate

PC-3細胞，人細胞 人細胞,Ke-3細胞 臍帶單核細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)碳酸銫(>99%，BR)質量規(guī)格：>99%,BRCesium carbonate

兔主動脈平滑肌細胞;CCC-SMC-21-(三氟乙酰)咪唑(用于GC衍生化,≥98.5%)質量規(guī)格：用于GC衍生化,≥98.5%1-(Trifluoroacetyl)imidazole
EPOR & CD131 Others Human 人 EPOR & CD131 Homodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) N,N,N,N-四甲基乙二安25毫克保存：-20℃，避光

HIT-T15 敘利亞倉鼠胰島β細胞DL-谷酰胺 DL-Glutamine,99% 6899-4-3 25G 通用試劑

CM-R035大鼠肝動脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL硅藻土 Kiqsqlguhr;Fossil fluor;Silicqous qcrth;DictoMccqous qcrth;Cqlitq;Supqr-cql;DictoMitq 91023-39-3

THP-1人單核細胞wo7iumphosphomolybdatehydrate鉬嶙酸鈉500克BR，95%

EB病毒轉化的人B細胞;KMY1002 人神經(jīng)元細胞完全培養(yǎng)基 100mLGlycogenTypeIX 100mg/500mg/1g原裝 Sigma G0885
大鼠小腸隱窩上皮細胞形態(tài)TLR4 Others Human 人 TLR4 / CD284 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 格列美脲Glimepiride質量規(guī)格：>99%,BR

CL-0331CTLL-2(小鼠T細胞)5×106cells/瓶×2灰黃霉素Griseofulvin;Fulcin質量規(guī)格：>97%,BR

BRL 3A, 大鼠肝正常細胞 人小細胞，NCI-H209細胞 HIT-T15(倉鼠beta胰島細胞)灰黃霉素(標準品)Griseofulvin質量規(guī)格：HPLC>97%,標準品

人導管癌細胞;HCC38透明質酸鈉；玻璃酸鈉 hyaluronate質量規(guī)格：>95%,蛋白≤0.1%

SERPINA3 Others Human 人 SerpinA3 / AACT 人細胞裂解液 (陽性對照) Hydrocortisone質量規(guī)格：>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)