試劑準(zhǔn)備：
1. 大鼠髓過氧化物酶 （MPO）elisa檢測試劑盒多少錢使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管，每個EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進(jìn)行30倍稀釋。

大鼠髓過氧化物酶 （MPO）elisa檢測試劑盒多少錢  Rat MPO ELISA Kit
【實(shí)驗(yàn)用途】髓過氧化物酶(MPO)是一種蛋白(分子質(zhì)量 118kDa)，含一對重鏈和輕鏈 ，它存于嗜中性多核細(xì)胞的嗜天青顆粒和巨嗜細(xì)胞中，其功能為將氯化物和過氧化氫轉(zhuǎn)變?yōu)榇温人猁}。在炎態(tài)下，它被釋放入細(xì)胞外液進(jìn)入循環(huán)，因此傳統(tǒng)認(rèn)為是一種殺菌的酶，在人體的天然防御 、方面起重要作用。此酶參與含(1ow density li—poprotein，LDL)的脂類氧化。以鄰位二氨基苯胺鹽酸鹽為底物加過氧化氫可定量血中和組織中的酶活性。MPO能氧化膽固醇(1ow density lipoprotein cholesterol，LD—LC)，從而有利于巨噬細(xì)胞攝取LDLC并轉(zhuǎn)變?yōu)榕菽?xì)胞 ；氧化(hi density lipoprotein，HDL)，使其失去正常的功能；另外，MPO激活金屬蛋白酶、使粥樣硬化斑塊表 面不穩(wěn)定趨于破裂；同時(shí) MPO還催化消耗 內(nèi)皮衍生的一 氧化氮(nitric oxide，NO)，從而減少 NO的生物利用度，損害 N0的擴(kuò)張和功能Is]。關(guān)于 MPO的測定方法有多 種，紫外分光光度比色法、流式細(xì)胞儀和免疫組織化學(xué)染色 法 用來檢測循環(huán)中和組織中多形核細(xì)胞的 MPO活性，而 近期出現(xiàn)的酶聯(lián)免疫的定量法可測定血液中MPO的濃度。所提供的elisa檢測試劑盒是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定elisa檢測試劑盒（ELISA）。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體，經(jīng)生物素（biotin）標(biāo)記。樣品和生物素標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng)；經(jīng)過PBS或TBS的徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。

試劑配制：
1、大鼠髓過氧化物酶 （MPO）elisa檢測試劑盒多少錢酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
注意事項(xiàng)：
1. 大鼠髓過氧化物酶 （MPO）elisa檢測試劑盒多少錢試劑盒使用前請保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完，請廢棄。
2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置，會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正常現(xiàn)象，微加熱至40℃使結(jié)晶完全溶解后再配制洗滌液。
（加熱溫度不要超過50℃）使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應(yīng)終止液除外）。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要，zui好使用微量振蕩器(使用zui低頻率)，如無微量振蕩器，可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時(shí)建議作雙孔檢測。
7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用，嚴(yán)禁在不同的液體之間混用！否則將影響試驗(yàn)結(jié)果。
8. 試驗(yàn)中請穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測血液或者其他體液標(biāo)本時(shí)，請按國家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行。
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