海藻糖酶(TREH)真核蛋白實驗原理
將海藻糖酶(TREH)抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本，其中的海藻糖酶(TREH)與連接于固相載體上的抗體結(jié)合，然后加入生物素化的海藻糖酶(TREH)抗體，將未結(jié)合的生物素化抗體洗凈后，加入HRP標(biāo)記的親和素，再次徹底洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的海藻糖酶(TREH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值)，計算樣品濃度。
實驗流程
1. 實驗前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100μL，37°C孵育1小時；
3. 吸棄，加檢測溶液A100μL，37°C孵育1小時；
4. 洗板3次；
5. 加檢測溶液B100μL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90μL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50μL，立即450nm讀數(shù)。
Bolton肉湯配套試劑
水解酪蛋白胨（MH）瓊脂
布氏肉湯
Skirrow瓊脂
改良CCD瓊脂基礎(chǔ)
Bolton肉湯基礎(chǔ)
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基
Skirrow瓊脂配套試劑
改良CCD瓊脂配套試劑
Bolton肉湯配套試劑
水解酪蛋白胨（MH）瓊脂
布氏肉湯
Skirrow瓊脂
改良CCD瓊脂基礎(chǔ)
Bolton肉湯基礎(chǔ)
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基
Skirrow瓊脂配套試劑
改良CCD瓊脂配套試劑
Bolton肉湯配套試劑
水解酪蛋白胨（MH）瓊脂
布氏肉湯
Skirrow瓊脂
改良CCD瓊脂基礎(chǔ)
Bolton肉湯基礎(chǔ)
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基
高氏合成1號瓊脂培養(yǎng)基
血平板 (成品培養(yǎng)基)
哥倫比亞血平板(成品培養(yǎng)基)
改良克氏雙糖培養(yǎng)基
硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基
