停乳鏈球菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒樣品RNA的抽提

停乳鏈球菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒樣品RNA的抽提:

①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。

②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的氯仿，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚氯仿相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。

巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP1β)重組蛋白
巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP3α)重組蛋白
巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)重組蛋白
抗酒石酸酸性磷酸酶(ACP5)重組蛋白
抗繆勒管激素(AMH)重組蛋白
抗增生抗體靶分子1(TAPA1)重組蛋白
抗增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)重組蛋白
顆粒酶A(GZMA)重組蛋白
顆粒酶B(GZMB)重組蛋白
顆粒酶H(GZMH)重組蛋白
顆粒酶K(GZMK)重組蛋白
克拉拉細(xì)胞蛋白16(CC16)重組蛋白
醌NADH脫氫酶1(NQO1)重組蛋白
酪氨酸酶(TYR)重組蛋白
類固醇5α還原酶1(SRD5α1)重組蛋白
類胰蛋白酶(TPS)重組蛋白
粒細(xì)胞集落刺激因子(GCSF)重組蛋白
粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GMCSF)重組蛋白
連環(huán)蛋白β1(CTNNβ1)重組蛋白
連接附著分子3(JAM3)重組蛋白
亮氨酰氨基肽酶(LAP)重組蛋白
淋巴細(xì)胞功能關(guān)聯(lián)抗原3(LFA3)重組蛋白
磷酸肌醇-3-激酶2α肽(PI3K2α)重組蛋白
磷脂酶A1(PLA1)重組蛋白